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體外轉(zhuǎn)錄的步驟有哪些

轉(zhuǎn)錄通常發(fā)生在生物體內(nèi),如果我們將含有RNA轉(zhuǎn)錄酶、NTP等條件,在體外無細(xì)胞系統(tǒng)中,用DNA作為模板,模仿體內(nèi)轉(zhuǎn)錄過程生成RNA,這樣的技術(shù)則能夠控制轉(zhuǎn)錄的基因、轉(zhuǎn)錄的過程和轉(zhuǎn)錄后RNA的用途,該技術(shù)被稱為體外轉(zhuǎn)錄 。
體外轉(zhuǎn)錄的步驟如下:
【體外轉(zhuǎn)錄的步驟有哪些】1、 提取cDNA質(zhì)粒;
2、 線性化質(zhì)粒;
3、 純化質(zhì)粒: 加等體積的Tris苯酚氯仿到100微米限制內(nèi)切酶消化體系,渦旋振蕩20秒, 13000克離心5分鐘 。上清轉(zhuǎn)移,加入2倍體積無水乙醇和1比10體積的的

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